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基因測(cè)序儀

2018.7.12

原理

abi prism 310型基因分析儀采用毛細(xì)管電泳技術(shù)取代傳統(tǒng)的聚丙烯酰胺平板電泳，應(yīng)用該公司ZL的四色熒光染料標(biāo)記的ddntp(標(biāo)記終止物法)，因此通過單引物pcr測(cè)序反應(yīng)，DNA測(cè)序儀生成的pcr產(chǎn)物則是相差1個(gè)堿基的3''''末端為4種不同熒光染料的單鏈dna混合物，使得四種熒光染料的測(cè)序 pcr產(chǎn)物可在一根毛細(xì)管內(nèi)電泳，從而避免了泳道間遷移率差異的影響，大大提高了測(cè)序的精確度。由于分子大小不同，在毛細(xì)管電泳中的遷移率也不同，當(dāng)其通過毛細(xì)管讀數(shù)窗口段時(shí)，激光檢測(cè)器窗口中的ccd(charge-coupled device)攝影機(jī)檢測(cè)器就可對(duì)熒光分子逐個(gè)進(jìn)行檢測(cè)，激發(fā)的熒光經(jīng)光柵分光，以區(qū)分代表不同堿基信息的不同顏色的熒光，并在ccd攝影機(jī)上同步成像，分析軟件可自動(dòng)將不同熒光轉(zhuǎn)變?yōu)閐na序列，從而達(dá)到dna測(cè)序的目的。分析結(jié)果能以凝膠電泳圖譜、熒光吸收峰圖或堿基排列順序等多種形式輸出。

它是一臺(tái)能自動(dòng)灌膠、自動(dòng)進(jìn)樣、自動(dòng)數(shù)據(jù)收集分析等全自動(dòng)電腦控制的測(cè)定dna片段的堿基順序或大小和定量的高檔精密儀器。pe公司還提供凝膠高分子聚合物，包括dna測(cè)序膠(pop 6)和genescan膠(pop 4)。這些凝膠顆?？讖骄?，避免了配膠條件不一致對(duì)測(cè)序精度的影響。它主要由毛細(xì)管電泳裝置、macintosh電腦、彩色打印機(jī)和電泳等附件組成。電腦中則包括資料收集，分析和儀器運(yùn)行等軟件。它使用最新的ccd攝影機(jī)檢測(cè)器，使dna測(cè)序縮短至2.5h，pcr片段大小分析和定量分析為 10～40min。

由于該儀器具有dna測(cè)序，pcr片段大小分析和定量分析等功能，因此可進(jìn)行dna測(cè)序、雜合子分析、單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(sscp)、微衛(wèi)星序列分析、長(zhǎng)片段pcr、rt-pcr(定量pcr)等分析，臨床上可除進(jìn)行常規(guī)dna測(cè)序外，還可進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性(snp)分析、基因突變檢測(cè)、hla配型、法醫(yī)學(xué)上的親子和個(gè)體鑒定、微生物與病毒的分型與鑒定等。

基因測(cè)序儀

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