如何看流式細(xì)胞周期結(jié)果圖
流式細(xì)胞術(shù)在許多研究生課題中常用到，但對其結(jié)果的分析卻不是很清楚。在此收集點(diǎn)相關(guān)資料并以實(shí)驗(yàn)中的一張圖片為例，大家共同學(xué)習(xí)。圖中白色箭頭及尾部G1,G2,S是我用PS加上去的，方便討論。流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期結(jié)果示圖 首先來認(rèn)識(shí)下圖：1、縱坐標(biāo)Cell Number：即計(jì)數(shù)到的有效細(xì)胞數(shù)；2、橫坐標(biāo)DNA Content：即DNA量，為什么用DNA量來區(qū)別各周期我們等下再講；3、G1、G2、S三期在上圖已經(jīng)用箭頭標(biāo)示；4、右側(cè)數(shù)字含義：Mean G1=195.4即G1期DNA含量平均值為195.4；%G1=73.6即G1期細(xì)胞數(shù)占總數(shù)的73.6%；以此類推關(guān)于結(jié)果的具體分析我們會(huì)在接下來一起學(xué)習(xí)討論。主要從細(xì)胞周期的角度看各參數(shù)的意義：1、細(xì)胞周期指由細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次細(xì)胞分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程，所需的時(shí)間叫細(xì)胞周期時(shí)間。可分為四個(gè)階段（見圖）：① G1期(gap1)，指從有絲分裂完成到期DNA復(fù)制之前的間隙時(shí)間；② S期(synthesis phase)，指DNA復(fù)制的時(shí)期；③ G2期(gap2)，指DNA復(fù)制完成到有絲分裂開始之前的一段時(shí)間；④ M期又稱D期(mitosis or division)，細(xì)胞分裂開始到結(jié)束。細(xì)胞周期圖示 2、從增殖的角度來看，可將高等動(dòng)物的細(xì)胞分為三類：①連續(xù)分裂細(xì)胞，在細(xì)胞周期中連續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)因而又稱為周期細(xì)胞，如表皮生發(fā)層細(xì)胞、部分骨髓細(xì)胞。②休眠細(xì)胞暫不分裂，但在適當(dāng)?shù)拇碳は驴芍匦逻M(jìn)入細(xì)胞周期，稱G0期細(xì)胞，如淋巴細(xì)胞、肝、腎細(xì)胞等。③不分裂細(xì)胞，指不可逆地脫離細(xì)胞周期，不再分裂的細(xì)胞，又稱終端細(xì)胞，如神經(jīng)、肌肉、多形核細(xì)胞等等。細(xì)胞周期的時(shí)間長短與物種的細(xì)胞類型有關(guān)，如：小鼠十二指腸上皮細(xì)胞的周期為10小時(shí)，人類胃上皮細(xì)胞24小時(shí)，骨髓細(xì)胞18小時(shí)，培養(yǎng)的人了成纖維 細(xì)胞18小時(shí)，CHO細(xì)胞14小時(shí)，HeLa細(xì)胞21小時(shí)。不同類型細(xì)胞的G1長短不同，是造成細(xì)胞周期差異的主要原因。3、流式細(xì)胞結(jié)果圖各參數(shù)的意義：常用的流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期的方法是依據(jù)細(xì)胞DNA含量（橫坐標(biāo)）來分析的：G1期：細(xì)胞DNA復(fù)制還沒有開始，也是DNA含量最少的，即流式檢測結(jié)果圖的第一個(gè)峰；S 期：細(xì)胞開始復(fù)制，到完成復(fù)制，是一個(gè)一倍DNA到二倍DNA的過程，在流式結(jié)果圖中顯示期跨度特別大（第二個(gè)不高但很寬的峰）；G2期：DNA復(fù)制完成至分裂的一段時(shí)間，此時(shí)細(xì)胞內(nèi)含二倍DNA，在流式結(jié)果圖中的第二個(gè)峰；M期：細(xì)胞分裂過程，此時(shí)細(xì)胞內(nèi)也是二倍DNA，用DNA含量的方法是無法與G2期分開，所以有第三峰明顯升高時(shí)報(bào)告：G2/M期阻滯。
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產(chǎn)品技術(shù)
