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如何用標準曲線法測定物質(zhì)含量

2021.9.20

以蘆丁為例,其他物質(zhì)測定方式雷同


儀器與試劑


1.儀器紫外-可見分光光度計;量瓶、移液管、吸量管。

2.試劑亞硝酸鈉,硝酸鋁,氫氧化鈉,乙醇(均為分析純),5%亞硝酸鈉溶液,10%硝酸鋁溶液,1mol/L氫氧化鈉溶液,30%乙醇溶液,蘆丁對照品,蘆丁(原料藥)。


實驗內(nèi)容與步驟


1.對照品溶液的制備精密稱取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品100mg,置100mL量瓶中,加甲醇70mL,置水浴上微熱使溶解,放冷,加甲醇至刻度,搖勻。精密吸取10mL,置100mL量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得(每1mL中含無水蘆丁0.1mg)。

2.標準曲線的制備精密量取對照品溶液(o.1mg/ml)o.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL,分別置于10mL量瓶中,各加30%乙醇使成5.0mL,各精密加入5%亞硝酸鈉溶液0.3mL,充分搖勻,放置6分鐘。各精密加入10%硝酸鋁溶液0.3mL,充分搖勻,放置6分鐘。各加1lmol/L氫氧化鈉溶液4.0mL,用蒸餾水稀釋至刻度,充分搖勻,放置15分鐘,用分光光度計,在510nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線。

3.試樣測定精密量取蘆丁試樣溶液(0.1mg/ml)3.0mL,置10mL量瓶中,按標準曲線制備項下自“各加30%乙醇使成5.0ml?!捌鹨婪ú僮髦敝翜y定出樣品的吸光度。


數(shù)據(jù)處理


1.根據(jù)測得的對照品的數(shù)據(jù),繪制A—C標準曲線或計算回歸方程。

2.根據(jù)測得的試樣的數(shù)據(jù),從標準曲線上讀出或由回歸方程計算出試樣溶液中蘆丁的重量(rag),按下式計算:

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